Servizio di clonaggio
Servizio di clonaggio personalizzato
La Bio-Fab offre un servizio di clonaggio personalizzato in un plasmide a vostra scelta o fornito direttamente da voi.
IL SERVIZIO COMPRENDE:
- Verifica dei siti di restrizione tramite digestione o sequenziamento
- Controllo del MCS sul plasmide ricevente (formito dal cliente)
- Taglio del frammento e ligasi nel plasmide ricevente
- Trasformazione, cultura cellulare e purificazione di 10 colonie random
- 12/15 giorni lavorativi per clonaggio
- Invio dell’allineamento con la sequenza di controllo wt e singolo elettroferogramma del clone positivo sequenziando i siti di aggancio al plasmide
- Invio di 1/4ug di DNA plasmidico purificato
Si sconsiglia l’uso di plasmidi molto grandi (>15kb, lentivirali...), low copy, o con sequenze molto ripetute o ricchi in GC perchè potrebbero riarrangiare facilmente o essere poco efficienti nella replicazione.
A RICHIESTA:
- Consulenza per stabilire la miglior strategia di clonaggio sulla base dell’applicazione finale (espressione, sequenziamento…)
- Controllo del frame dell’inserto
- Sequenziamento dell’intero inserto con sintesi dei relativi oligo che verranno conservati nella Banca Oligo personale.
Si fa notare che il compimento di tutti i controlli di qualità previsti, pur non garantendo il funzionamento del clone , daranno comunque diritto alla Bio-Fab a ricevere il pagamento concordato fino alla fase del progetto svolto.
MATERIALE DA SPEDIRE IN LABORATORIO:
- Plasmide purificato* contenente il DNA da clonare, proveniente da un ceppo di E.coli dam+. I plasmidi isolati da ceppi dam- non sono idonei (per es. jm110, scs110, BL21 DE3)
- mappa del plasmide con indicazione della resistenza all'antibiotico e sequenza del DNA target
- istruzioni per il clonaggio: siti di restrizione da utilizzare
*per le quantità contattare il laboratorio all’indirizzo Questo indirizzo email è protetto dagli spambots. È necessario abilitare JavaScript per vederlo.
Contattaci per info o per richiedere un preventivo! Questo indirizzo email è protetto dagli spambots. È necessario abilitare JavaScript per vederlo.
Excel
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ISTRUZIONI TRASFORMAZIONE DNA
Servizio di clonaggio tramirePcr
Il nostro servizio permette di clonare sequenze, sia note che non, da DNA plasmidico, genomico e cDNA. Questo indirizzo email è protetto dagli spambots. È necessario abilitare JavaScript per vederlo.
Il servizio comprende:
- progettazione e sintesi oligo nucleotidi per PCR
- clonaggio in un nostro vettore standard
- sceening dei cloni ottenuti tramite sequenziamento
- analisi dei risultati ed eventuali ricerche in genebank
Materiale richiesto:
- DNA templato
- Eventuale sequenza del DNA da clonare
- Form compilato in ogni sua parte
I tempi di consegna sono di due settimane.
Verrà consegnato almeno 1 ug del costrutto con i dati e i dettagli dei relativi esperimenti.
Le strategie e gli accordi possono variare in funzione della complessità del progetto.